Praxis der Hochleistungs-Flüssigchromatographie

Anwender der HPLC benötigen ein breites theoretisches und praktisches Wissen. In diesem Standardwerk wird beides vermittelt. Die international renommierte Autorin erklärt Theorie, apparative Grundlagen, die verschiedenen HPLC-Prinzipien sowie Spezialgebiete. In die 10. Auflage wurden neue Abschnitte über Lösungsmitteleigenschaften, über Laser Induced Fluorescence, über Hydrophilic Interaction Chromatography und über Two-Dimensional HPLC aufgenommen.

Autorentext
Veronika Meyer is Lecturer at the University of Bern and Senior Scientist at EMPA, the Swiss Federal Laboratories for Materials Testing and Research. She is Member of the Editorial Board of Chimia and vice-president of the Division of Analytical Chemistry of the Swiss Chemical Society. Special interests: analytical chemistry, chromatography, measurement uncertainty. V. Meyer is author or co-author of numerous publications in international scientific journals.

Klappentext
Die inzwischen zehnte Auflage dieses bewährten Standard-Lehrbuches der HPLC hat eine Verjüngungskur erfahren: die Qualitätssicherung wird in einem eigenen Kapitel ausführlicher dargestellt und die Problembehebung ist entsprechend ihrer gewachsenen Bedeutung gründlich überarbeitet und erweitert worden. Aktualisiert oder neu hinzugekommen sind: Methodenvergleich (HPLC/Kapillarelektrophorese), Peakkapazität, Mischungskreuz, Van Deemter-Kurven, Hydrophilic Interaction Chromatographie, Methodentransfer, Comprehensive zweidimensionale HPLC, schnelle Trennungen bei 1000 bar (UPLC), HPLC mit superheißem Wasser und viele aktuelle Literaturzitate. Der Text ist im gewohnten Layout mit Randspalte gesetzt, die die Kommentare zum Text enthält. Auf diese Weise kann trotz enormer Informationsdichte die Lesbarkeit und Übersichtlichkeit gewahrt werden. Auch heute noch benötigen Anwender der HPLC ein breites theoretisches und praktisches Wissen. Veronika Meyer vermittelt beides: Theorie und apparative Grundlagen, mit unzähligen Trennungsbeispielen, mit noch mehr Diagrammen und Schemazeichnungen reichlich bebildert und abgerundet mit Übungsaufgaben, durch die sich der Stoff vertiefen lässt. Veronika Meyer Lehre als Chemielaborantin 1968-1971 (noch ohne HPLC?), anschließend dreijähriges Chemiestudium an der Fachhochschule Burgdorf, Schweiz. 1976-1998 Tätigkeit an der Universität Bern, vor allem HPLC. Erste Auflage der "Praxis der HPLC" im Jahr 1979. Später nebenbei Studium und Doktorat an der Universität Bern (Dr. phil. nat. 1989). Post-doc Aufenthalt am Weizmann-Institut in Rehovot, Israel, und an der University of Delaware, USA, anschließend Oberassistentin an der Universität Bern. Habilitation 1996. Seit 1998 an der EMPA (Eidgenössische Materialprüfungs- und Forschungsanstalt) St. Gallen. Interessensgebiete: Chromatographie, analytische Chemie, Messunsicherheit. Zahlreiche Publikationen in internationalen Fachzeitschriften. Lehrtätigkeit an der Universität Bern.

Inhalt
WICHTIGE UND NÜTZLICHE GLEICHUNGEN FÜR DIE HPLC EINLEITUNG HPLC: Eine leistungsfähige Trennmethode Ein erstes HPLC-Experiment Die flüssigchromatographischen Trennverfahren Die HPLC-Apparatur Sicherheit am HPLC-Arbeitsplatz Vergleich von Hochleistungs-Flüssigchromatographie und Gaschromatographie Vergleich von Hochleistungs-Flüssigchromatographie und Kapillarelektrophorese Verschiedene Maßeinheiten Wissenschaftliche Zeitschriften Empfehlenswerte Bücher THEORETISCHE GRUNDLAGEN Der chromatographische Prozess Bandenverbreiterung Das Chromatogramm und seine Aussage Graphische Darstellungen von Peakpaaren mit verschiedener Auflösung Die Beeinflussung der Auflösung Totvolumina (extra-column-Volumina) Tailing Peakkapazität und statistische Auflösungswahrscheinlichkeit Temperatureinflüsse in der HPLC Die Grenzen der HPLC Wie erreicht man Peakkapazität? PUMPEN Allgemeines Die Kurzhub-Kolbenpumpe Unterhalt und Reparaturen Andere Pumpentypen BEREITSTELLUNG DER APPARATUR BIS ZUR PROBENAUFGABE Auswahl der mobilen Phase Vorbereitung der mobilen Phase Gradientensysteme Kapillarleitungen Fittings Probenaufgabesysteme Probelösung und Probevolumen LÖSUNGSMITTELEIGENSCHAFTEN Tabelle organischer Lösungsmittel Lösungsmittelselektivität Mischbarkeit Puffer Haltbarkeit von mobilen Phasen Das Mischungskreuz DETEKTOREN Allgemeines UV-Detektoren Brechungsindex-Detektoren Fluoreszenz-Detektoren Elektrochemische (amperometrische) Detektoren Lichtstreuungs-Detektoren Andere Detektoren Mehrfachdetektion Indirekte Detektion Kopplung mit Spektroskopie SÄULEN UND STATIONÄRE PHASEN Säulen für die HPLC Vorsäulen Allgemeines über stationäre Phasen Silicagel Chemisch modifiziertes Silicagel Styrol-Divinylbenzol Einige weitere stationäre Phasen Vorsichtsmaßnahmen und Regeneration DAS TESTEN VON HPLC-SÄULEN Einfache Tests für HPLC-Säulen Bestimmung der Korngröße Bestimmung der Totzeit Das Testgemisch Dimensionslose Größen zur Charakterisierung von HPLC-Säulen Die van Deemter-Gleichung aus reduzierten Größen und ihre Nützlichkeit für die Säulendiagnose Van Deemter-Kurven und andere Zusammenhänge Diffusionskoeffizienten ADSORPTIONS-CHROMATOGRAPHIE Was heißt Adsorption? Die elutrope Reihe Selektivitätseigenschaften der mobilen Phase Wahl und Optimierung der mobilen Phase Anwendungsbeispiele UMKEHRPHASEN-CHROMATOGRAPHIE Prinzip Mobile Phasen in der Umkehrphasen-Chromatographie Selektivität und Stärke der mobilen Phase Stationäre Phasen Methodenentwicklung in der Umkehrphasen-Chromatographie Anwendungsbeispiele Hydrophobic-Interaction-Chromatographie CHROMATOGRAPHIE MIT CHEMISCH GEBUNDENEN PHASEN Einführung Eigenschaften spezieller Phasen Hydrophilic-Interaction-Chromatographie IONENAUSTAUSCH-CHROMATOGRAPHIE Einführung Prinzip Eigenschaften von Ionenaustauschern Der Einfluss der mobilen Phase Spezielle Möglichkeiten für den Ionenaustausch Praktische Hinweise Anwendungsbeispiele IONENPAAR-CHROMATOGRAPHIE Einführung Praxis der Ionenpaar-Chromatographie Anwendungsbeispiele UV-Detektion mit Hilfe von Ionenpaar-Reagenzien IONENCHROMATOGRAPHIE Prinzip Unterdrückungstechniken Phasensysteme Anwendungen AUSSCHLUSS-CHROMATOGRAPHIE Prinzip Das Kalibrierchromatogramm Molekülmassenbestimmungen von Ausschluss-Chromatographie Hintereinanderschalten von Ausschluss-Säulen Phasensysteme Anwendungen AFFINITÄTS-CHROMATOGRAPHIE Prinzip Affinitäts-Chromatographie als Spezialfall der HPLC Anwendungsbeispiele WAHL DER METHODE Die verschiedenen Möglichkeiten Methodentransfer MÖGLICHKEITEN ZUR LÖSUNG DES ELUTIONSPROBLEMS Das Elutionsproblem Lösungsmittelgradienten Säulen zusammenschalten Comprehensive zweidimensionale HPLC Die Optimierung eines isokratischen Chromatogramms mit vier Lösungsmitteln Die Optimierung der übrigen Parameter Gemischte stationäre Phasen ANALYTISCHE HPLC Qualitative Analyse Spurenanalyse Quantitative Analyse Wiederfindung Peakhöhen- und Peakflächenmessung zur quantitativen Analyse Integrationsfehler Die Detektionswellenlänge Derivatisierung Unerwartete Peaks:Geister- und Systemspeaks QUALITÄTSSICHERUNG Wozu der Aufwand? Verifizierung mit einer zweiten Methode Methodenvalidierung Standard-Arbeitsanweisungen Messunsicherheit Qualifikationen, Gerätetest und Systemeignungstest Qualitätssicherungsmaßnahmen PRÄPARATIVE HPLC Problemstellung Die Praxis der präparativen HPLC Überladungseffekte Proben sammeln Rezyklieren Verdrängungs-Chromatographie TRENNUNG VON ENANTIOMEREN Problemstellung Chirale mobile Phasen Chirale flüssige stationäre Phasen Chirale feste stationäre Phasen Indirekte Enantiomerentrennung SPEZIELLE MÖGLICHKEITEN Mikro-, Kapillar- und Chip-HPLC Schnelle und superschnelle HPLC Schnelle Trennungen bei 1000 bar: UPLC HPLC mit superkritischen mobilen Phasen: SFC HPLC mit superheißem Wasser Eletrochromatographie ANHANG 1: ANGEWANDTE HPLC-THEORIE ANHANG 2: DURCHFÜHRUNG DES GERÄTETESTS Allgemeines Testablauf Vorbereitung Leistungsüberprüfung der Pumpen Leistungsüberprüfung des UV-Detektors Leistungsüberprüfung des Autosamplers Leistungsüberprüfung des Säulenofens…

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